新城疫、禽流感(H9亞型)二聯(lián)滅活疫苗臨床應(yīng)用效果實(shí)驗(yàn)

郭照成龐亮孫心叢秋實(shí)王建琪 韓春嬌王風(fēng)亮郭昌友李叔偉☆

(哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，黑龍江哈爾濱，150030)

Newcastle Disease and Avian Influenza (H9 Subtype) Inactivated Vaccineclinical application effect of the experiment

GUO Zhaocheng, PANG Liang, SUN Xin, CHONG Qiu-shi, WANG Jian-qi, HAN Chun-jiao, WANG Feng-liang, GUO Chang-you, LI Shu-wei☆

（Harbin Pharmaceutical Group Bio-vaccine Co.,Ltd，Harbin150030，China）

Abstract:This experiment by detecting antibody titer of Newcastle disease,avian flu (H9 subtype) duplex inactivated vaccine of different manufacturer in different inoculation days of age and vaccination dose toevaluate the effect ofthe inactivated vaccine. Results show that chicks in 7-days-oldwere vaccinatedthe inactivated vaccine that produced antibodies is higher than antibodies of 1-day-old vaccination, and the more the dose of vaccination the more antibodies. Through the experiment found the optimalimmune days of ageandimmune doseto provide clinical basis for the prevention of Newcastle disease and H9avian influenza.

Keywords:Newcastle disease, H9avian influenza,HI

摘要：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)不同廠家的新城疫、禽流感(H9亞型)二聯(lián)滅活疫苗在不同接種日齡和不同接種劑量產(chǎn)生抗體效價(jià)值的情況，來(lái)評(píng)價(jià)新流二聯(lián)滅活疫苗對(duì)雞群預(yù)防新城疫和H9流感疫病的效果。結(jié)果表明雛雞在7日齡接種新流二聯(lián)滅活疫苗所產(chǎn)生的新城疫和H9抗體值高于1日齡接種所產(chǎn)生的抗體值，且接種的劑量越大所產(chǎn)生的抗體值越高。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)找到最適合雞群免疫此疫苗的免疫日齡和免疫劑量，為我們預(yù)防新城疫和H9流感疫病提供臨床效果的依據(jù)。

關(guān)鍵詞：新城疫、H9亞型流感、HI

雞新城疫是禽類主要病毒性傳染病之一，對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的危害極大[1]。近年來(lái)，ND在我們有普遍蔓延的趨勢(shì)，目前許多雞場(chǎng)仍將采用接種疫苗的方式來(lái)預(yù)防該病。對(duì)于新城疫疫苗，我國(guó)主要是引進(jìn)國(guó)外的一些弱毒株，如V4株、La Sota株和B1株等[2]，來(lái)預(yù)防雞ND。近年來(lái)，H9N2亞型禽流感流行日益頻繁，病毒也進(jìn)入一個(gè)快速進(jìn)化階段，許多雞場(chǎng)的雞接種疫苗后保護(hù)效果較差，2002年后H9N2亞型禽流感在商品肉雞上發(fā)病日益嚴(yán)重，造成較高死亡率[3]。而從2007年后，由于H9亞型分支發(fā)生改變，H9引起的臨床癥狀也發(fā)生改變，國(guó)內(nèi)開(kāi)始采取最近地方分離出來(lái)的H9毒株來(lái)預(yù)防此類疾病。

近些年我國(guó)雞ND和H9混合感染的幾率在逐年上升，目前使用新流二聯(lián)疫苗預(yù)防這兩種疾病效果很好，但是很多地區(qū)在使用此類疫苗時(shí)，免疫方法和接種劑量都有所不同，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)蛋雛雞接種新流二聯(lián)疫苗，在不同首免日齡和不同免疫劑量進(jìn)行抗體檢測(cè)，以此找出最佳的免疫時(shí)間和免疫劑量，為預(yù)防ND和H9疫病提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物

 1日齡商品蛋雛雞5500只，黑龍江省哈爾濱市某養(yǎng)殖場(chǎng)。

1.2試驗(yàn)用藥

哈藥疫苗：黃瓶新流二聯(lián)滅活疫苗20150507、視界新流二聯(lián)滅活疫苗20150310、國(guó)內(nèi)某廠家新流二聯(lián)滅活疫苗，國(guó)外某廠家新流二聯(lián)滅活疫苗、ND和H9標(biāo)準(zhǔn)抗原及陽(yáng)性血清購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)

分組情況：蛋雛雞雞每組500只，詳見(jiàn)表1：

表1實(shí)驗(yàn)分組情況

A、B、C、D組1日齡按以上疫苗進(jìn)行免疫，免疫前采血，進(jìn)行新城疫和H9抗體檢測(cè)。免疫后的7、14、21天每組隨機(jī)抽取20只雞采血，分離血清，進(jìn)行新城疫和H9抗體檢測(cè)，并計(jì)算平均值。

E、F、G、H、IJ、K組7日齡按以上疫苗進(jìn)行免疫，免疫前采血，進(jìn)行新城疫和H9抗體檢測(cè)。免疫后的7、14、21天采血，分離血清，進(jìn)行新城疫和H9抗體檢測(cè)，并計(jì)算平均值。

2結(jié)果與分析

表2 不同廠家0日齡相同免疫劑量ND抗體效價(jià)（log2）

相同劑量，在1日齡免疫不同疫苗，在14日齡開(kāi)始產(chǎn)生新城疫抗體值，在21日齡時(shí)，A、C組免疫效果要好于D組，A組免疫效果最好。

表3 不同疫苗、不同日齡、相同的免疫劑量ND抗體效價(jià)（log2）

1日齡首免和7日齡首免新流油苗，從結(jié)果看7日齡首免，在免疫后21天產(chǎn)生的新城疫抗體值要高于1日齡首免。E組新城疫抗體值要高于F組。

表4 相同的日齡，不同免疫劑量ND抗體效價(jià)（log2）

從結(jié)果看，在免疫同意疫苗14天產(chǎn)生新城疫抗體值看，到免疫后21日齡I組相對(duì)較好，也就是說(shuō)免疫劑量大的抗體值更好一些。但是免疫0.1和0.2ml劑量從疫苗開(kāi)始產(chǎn)生抗體值看，也能夠?qū)π鲁且卟∑鸨Ｗo(hù)作用。

表5 相同免疫劑量ND抗體效價(jià)（log2）

相同劑量不同疫苗在7日齡免疫后，免疫后的14—21日齡H,I組新城疫抗體值要明顯好于K組，到免疫后的21日齡，I組效果更好。

表6 不同廠家，1日齡免疫相同劑量H9抗體效價(jià)（log2）

在1日齡免疫相同劑量的不通過(guò)疫苗，在疫苗免疫7天后，7日齡H9抗體值D組較高，B組次之，免疫后的14、21日齡,四個(gè)組H9抗體值都相對(duì)偏低，這可能與免疫日齡和免疫劑量有關(guān)。

表7不同疫苗、不同日齡、相同的免疫劑量H9抗體效價(jià)（log2）

1日齡首免和7日齡首免新流油苗，從結(jié)果看7日齡首免，在免疫后21天產(chǎn)生的H9抗體值要高于1日齡首免。E組抗體值要高于F組。

表8相同的日齡，不同免疫劑量H9抗體效價(jià)（log2）

不同劑量相同疫苗在7日齡首免，從結(jié)果看免疫劑量最大的I組H9免疫效果最好，免疫劑量最小的F組免疫效果相對(duì)不高。

表9相同免疫劑量H9抗體效價(jià)（log2）

相同劑量不同疫苗在7日齡首免后，在免疫后21日日齡看，H、I組H9免疫效果要高于K組；H組與I組相比較，I組免疫效果要好于H組。

3討論

3.1對(duì)于蛋雛雞來(lái)說(shuō)，目前免疫新流二聯(lián)滅活疫苗的首免時(shí)間主要有兩個(gè)，一個(gè)是在1日齡進(jìn)行首免，還有就是在7日齡左右進(jìn)行首次免疫。通過(guò)1日齡首免和7日齡首免進(jìn)行抗體效價(jià)的對(duì)比看，7日齡首免的抗體值要高一些，這與母源抗體有關(guān)系。目前雛雞ND和H9流感的母源抗體值相對(duì)很高，本實(shí)驗(yàn)ND的母源抗體值在6log2以上，H9的抗體值在8log2以上，在這種情況下，母源抗體能維持雛雞21日齡，此時(shí)抗體值能為此4log2左右，對(duì)雞群是有保護(hù)力的，那么在這種情況下，7日齡首免新流二聯(lián)滅活疫苗所產(chǎn)生的抗體值就會(huì)受母源抗體的干擾小，在抗體效價(jià)和保護(hù)持續(xù)時(shí)間上都要比1日齡首免效果好一些。

3.2目前很多地區(qū)對(duì)于油苗的接種劑量也存在不同的看法，本實(shí)驗(yàn)選取哈藥生物疫苗一款高端新流二聯(lián)滅活疫苗分三個(gè)劑量0.1ml、0.2ml、0.3ml分別對(duì)雞群進(jìn)行接種，檢測(cè)免疫后產(chǎn)生的抗體水平高低，首免日齡是7日齡。從結(jié)果看接種劑量最大的所產(chǎn)生的抗體值也是最高的，接種劑量與抗體值成正比關(guān)系。接種劑量0.1ml所產(chǎn)生的抗體值對(duì)雞群也有保護(hù)力，那么具體接種劑量根據(jù)實(shí)際情況定，如在ND和H9感染壓力大的地區(qū)，接種劑量就要用0.3ml，感染壓力相對(duì)輕微的地區(qū)接種劑量可以是0.1ml或者是0.2ml。在秋冬季節(jié)時(shí)接種疫苗也要使用最大劑量。

3.3目前我國(guó)使用新流二聯(lián)滅活疫苗預(yù)防ND和H9的發(fā)生，各生物疫苗廠家新流二聯(lián)疫苗在抗體效價(jià)方面略有差別，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看不同廠家新流二聯(lián)疫苗接種后所產(chǎn)生的ND和H9抗體值有差別，但是差異不顯著，這主要是與生產(chǎn)工藝有關(guān)系。新流二聯(lián)滅活疫苗當(dāng)中的H9毒株各廠家都不想同，目前我們所使用的H9毒株大部分都是地方分析毒株，而國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)毒株使用較少。我國(guó)H9亞型AIV在2007年之前，是以第h9.4.2.1、第h9.4.2.2分支、第h9.4.2.3分支和第h9.4.2.4分支為主的，2007年之后，我國(guó)H9亞型AIV以第h9.4.2.5分支為主，而且隨著毒株流行的不同，H9疫病的臨床表現(xiàn)也不相同。所以說(shuō)我們?cè)谑褂眯铝鞫��?lián)疫苗時(shí)，所選用的H9毒株要盡可能使用H9亞型AIV以第h9.4.2.5分支上的。

參考文獻(xiàn)

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H9N2

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